ACCUTASE 細(xì)胞消化液 AT104——上海起發(fā)現(xiàn)貨

細(xì)胞分離會(huì)影響體外培養(yǎng)細(xì)胞的表面蛋白和細(xì)胞表型，所以選擇合適的細(xì)胞分離方法是至關(guān)重要的。我們分離貼壁細(xì)胞常用的方法是蛋白酶消化，如胰酶消化，但是在胰酶消化的過(guò)程中大部分表面蛋白和細(xì)胞外基質(zhì)成分都會(huì)受損，而且過(guò)度酶解不僅會(huì)影響表面marker的分析，還會(huì)降低細(xì)胞活力，尤其是干細(xì)胞的活力。因此，出現(xiàn)了這款胰酶替代物——Accutase。

Accutase是一種含有蛋白水解和膠原溶解酶的細(xì)胞分離溶液，而且這些酶既不是哺乳動(dòng)物也不是細(xì)菌衍生的，因此它是不含任何動(dòng)物或細(xì)菌來(lái)源的，是胰蛋白酶-EDTA消化液的替代品，可以應(yīng)用于多種干細(xì)胞的培養(yǎng)及消化傳代、海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)、神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)等。由于Accutase較為溫和，分離后的細(xì)胞能保持完好的表面抗原，因此在分離細(xì)胞系以進(jìn)行持續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞表面標(biāo)志物分析、病毒生長(zhǎng)測(cè)定、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖和腫瘤細(xì)胞遷移測(cè)定方面非常有效。

1. 同時(shí)具備蛋白酶和溶膠原活性，適合大部分細(xì)胞的消化，應(yīng)用范圍更為廣泛；

2. 消化更溫和，不會(huì)破壞細(xì)胞表面抗原，能夠維持細(xì)胞最大的活力；

3. 不需清洗或中和反應(yīng)，加入培養(yǎng)基即可使Accutase酶失活，節(jié)省細(xì)胞傳代時(shí)間

產(chǎn)品描述

Accutase是包含有蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細(xì)胞。適用于組織解離和細(xì)胞分離，因分離后的細(xì)胞能保持完好的表面抗原，且不含任何動(dòng)物或者細(xì)菌來(lái)源組分，可滿足對(duì)后續(xù)如細(xì)胞表面標(biāo)記、病毒生長(zhǎng)分析、流式細(xì)胞分析以及生物反應(yīng)器相關(guān)檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)的要求。

與傳統(tǒng)的胰酶消化液相比，本品具有以下優(yōu)勢(shì)：

1）適用于絕大多數(shù)原代細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的消化，以及昆蟲細(xì)胞；

2）溫和有效的消化干細(xì)胞（hESCs和mESCs），凍存后細(xì)胞具更高復(fù)蘇率；

3）幾分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)粘附細(xì)胞的分離，不需清洗或中和反應(yīng)，節(jié)省細(xì)胞傳代時(shí)間；

4）對(duì)細(xì)胞消化較為溫和，能增加細(xì)胞產(chǎn)量和存活率；增強(qiáng)細(xì)胞貼壁效率；改善細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞生長(zhǎng)特性等。

本品為即用型的無(wú)菌產(chǎn)品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚紅），比活力≥200 u/mL，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。收到后請(qǐng)于-20 ℃保存，有效期2年。2~8 ℃保存，有效期2個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1）Accutase融化后4 ℃保存，至少2個(gè)月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量，放到-80℃凍存，至少6個(gè)月穩(wěn)定。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase，之后進(jìn)行分裝保存。

【注】：不可37 ℃融化本品，否則會(huì)影響酶活。

2. 使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤(rùn)洗細(xì)胞一次；

3. 以無(wú)菌操作的方式，按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細(xì)胞；

4. 重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)，消化5-10 min；

【注】：消化時(shí)間可自行調(diào)整。大部分細(xì)胞處于Accutase中高達(dá)1小時(shí)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)無(wú)影響。

5. 消化結(jié)束后，輕輕敲擊培養(yǎng)皿，使細(xì)胞與皿底部脫離，依照常規(guī)操作進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和傳代。

【注】：不需另做清洗和酶活終止步驟。