KlenTaq-S測序酶是一種專為DNA測序而優(yōu)化的熱穩(wěn)定DNA聚合酶。結(jié)合了高保真性和鏈置換活性的特點(diǎn),使得它在分子生物學(xué)研究和臨床診斷中非常有用。特別適合用于PCR產(chǎn)物的直接測序,因?yàn)樗軌蛴行У販p少由于模板二級結(jié)構(gòu)引起的停滯問題。
KlenTaq-S測序酶的主要特點(diǎn):
1.準(zhǔn)確性高:優(yōu)化的活性減少了在DNA復(fù)制過程中的錯(cuò)誤率。
2.抗停滯能力:鏈置換活性有助于克服模板DNA上的二級結(jié)構(gòu)障礙。
3.熱穩(wěn)定性:能夠在高溫下保持活性,適用于各種PCR循環(huán)。
4.適用性廣:適用于各種類型的DNA模板,包括GC富集區(qū)域和復(fù)雜結(jié)構(gòu)。
5.兼容性好:可以與多種測序平臺和標(biāo)記技術(shù)配合使用。
應(yīng)用領(lǐng)域:
1.基因組學(xué)研究:在全基因組測序、重測序項(xiàng)目中用于高效準(zhǔn)確的DNA測序。
2.臨床診斷:在遺傳病診斷和病原體檢測中提供高質(zhì)量的序列數(shù)據(jù)。
3.法醫(yī)學(xué):用于法醫(yī)DNA分析,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
4.生物制藥:在藥物開發(fā)中用于克隆和表達(dá)基因的序列驗(yàn)證。
KlenTaq-S測序酶的操作流程:
1.準(zhǔn)備模板:提取并純化目標(biāo)DNA,確保質(zhì)量符合測序要求。
2.設(shè)計(jì)引物:根據(jù)目標(biāo)序列設(shè)計(jì)合適的測序引物。
3.PCR擴(kuò)增:使用測序酶進(jìn)行PCR反應(yīng),擴(kuò)增目標(biāo)片段。
4.清潔PCR產(chǎn)物:去除未結(jié)合的引物、dNTPs和其他可能影響測序的雜質(zhì)。
5.測序反應(yīng):將PCR產(chǎn)物與標(biāo)記的dNTPs和測序引物混合,進(jìn)行測序反應(yīng)。
6.電泳分析:將標(biāo)記的DNA片段進(jìn)行電泳分離,然后通過檢測設(shè)備讀取信號。
7.數(shù)據(jù)分析:使用專業(yè)軟件分析電泳結(jié)果,得到DNA序列。